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膠體金免疫層讀卡儀的功能和原理
文章來源:深芬儀器    時間:2020-01-02 17:54:56   

膠體金免疫層讀卡儀的功能和原理

膠體金(colloidal gold)是氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,金離子還原后聚合成的一定大小的金顆粒,它由一個基礎的晶核(11個金原子形成的二十面體)和包圍在外的雙離子層構成(內層為負離子層AuCl2-,外層是帶正電荷的H+)。由于靜電作用,金顆粒之間相互排斥而懸浮成為一種穩定的膠體狀態,形成帶負電的疏水膠溶液,故稱膠體金。


膠體金具有高電子密度,能與多種生物大分子結合,已成為繼熒光素、放射性同位素和酶之后,在免疫標記技術中較常用的一種非放射性示蹤劑。膠體金的粒徑一般在1-100nm之間,能夠均勻、穩定地分散在液體中,呈球形小顆粒或橢圓形大顆粒。膠體金顆粒最外層可以吸附大量的正離子,能夠均勻分散在溶液中。由于膠體金表面呈負電性,能夠與表面帶正電荷的抗原、抗體通過靜電作用進行標記。


膠體金免疫層讀卡儀可以檢測血凝法、酶聯免疫法、膠體金法制成的獸藥、瘦肉精、抗生素、動物疫病等快速檢測卡;金標讀卡儀廣泛應用于醫院學校、養殖場、屠宰場、肉產品深加工企業、檢驗檢疫等單位的食用。傳統的金標診斷試劑,主要通過目測觀察來判斷檢驗結果,只能用于定性檢測,而且受人為因素影響較大,檢測結果無法進行數據保存,不便于追蹤溯源和歷史記錄的查詢,膠體金免疫層讀卡儀可以讀取檢測卡量化的結果值,取代了傳統肉眼觀察結果的方式,使得檢測結果更加的精準,客觀,穩定。

膠體金免疫層讀卡儀

膠體金法檢測原理


將特異性的抗體以條帶狀固定在膜上(T線),膠體金標記試劑吸附在結合上(金墊),當待檢抗原加到試紙條一端的樣本墊上后,樣本通過毛細作用向前移動,溶解結合墊上的膠體金標記試劑后相互反應,再移動至固定的抗原或抗體的區域時,待檢物與金標試劑的結合物又與之發生特異性結合而被截留,聚集在檢測帶上,可通過肉眼觀察到顯色結果。


膠體金技術優勢與不足

優勢

快速:所有反應能在15分鐘內完成;

操作簡便:便于個人自測或醫院檢測;

成本低:不需要特殊的儀器設備;

穩定性好:試劑效期可達兩年或更長時間;


缺點

較ELISA、化學發光等方法靈敏度低;

易出現假陽性、假陰性;

存在HOOK效應;

膠體金試劑條組成

膠體金試紙條主要由樣品墊、金墊、硝酸纖維素膜(NC膜)、吸水紙4個部分組成,從上至下依次首尾互相銜接,粘貼在PVC底板上。


作用

a. 樣品墊:檢測樣本滴加位置,對檢測樣本具有一定的過濾和緩沖作用,降低樣本中離子強度或酸堿度對檢測結果的干擾。

b. 金墊:將膠體金標記抗體通過干燥固定在玻璃纖維素膜上,是追蹤抗體與抗原的反應。

c. 硝酸纖維素膜:膜上預先包被上檢測線和質控線,能夠與膠體金標記物發生免疫反應相結合,使膠體金在檢測線發生聚集,根據檢測線的顯色狀況進行判讀結果。

d. 吸水墊:通過吸水作用使液體樣品向上流動,帶動金墊的金標抗體向上移動,從而與檢測線的抗原發生反應。

上一個:深芬儀器膠體金讀卡儀治理畜牧用藥超標濫用抗生素 2020-01-02
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